【团体标准】 连翘种子质量标准

1试验材料的来源2016年10月至2017年3月，收集山西省连翘主产区连翘种子16份，种子的收集充分考虑到育苗区生态差异、主产区、一般产区以及行政区划，具体到行政村、海拔和经纬度，每份种子大于300g。所有种子经长治学院植生物技术专业金山副教授鉴定均为连翘种子。各生态区域种子编号后带回实验室，用于连翘种子质量标准研究。表1连翘种子的产地来源序号种子收集地点经纬度坐标海拔/m1山西省长治市长治县韩店镇韩川村113°6′54.78″E36°4′35.82″N9762山西省长治市壶关县石坡乡南平头坞村113°42′90.56″E35°96′24.14″N10303山西省长治市屯留县张店镇八泉村112°51′59.27″E36°29′46.28″N9554山西省长治市长子县色头镇地河村112°89′92.37″E35°94′62.92″N9435山西省长治市平顺县东寺头乡羊老岩村113°63′53.67″E36°16′04.66″N13256山西省长治市平顺县虹梯关乡界畔峧村113°54′14.87″E36°23′41.27″N12967山西省长治市沁源县郭道镇伏贵村112°21′46.56″E36°74′67.72″N12008山西省长治市黎城县西井镇西井村113°42′00.65″E36°74′99.32″N7839山西省晋中市左权县羊角乡小羊角村113°75′19.43″E36°91′52.94″N115710山西省晋城市陵川县古郊乡古郊村113°51′16.12″E35°70′98.99″N129311山西省晋城市泽州县晋庙铺镇小口村112°87′97.29″E35°27′4.63″N87512山西省晋城市沁水县中村镇下川村112°02′51.51″E35°44′80.26″N98213山西省临汾市安泽县良马乡东沟村112°46′15.32″E36°23′14.78″N86114山西省临汾市古县南垣乡陈香村112°02′00.54″E36°10′26.27″N86115山西省运城市闻喜县薛店镇薛店村111°21′30.78″E35°47′54.45″N50616山西省运城市夏县瑶峰镇马蹄古垛村111°70′80.12″E35°40′95.46″N4092种子质量检测2.1种子检测流程图2.2扦样参照GB/T3543.2（农作物种子检验规程——扦样）进行扦样，种子批的最大重量按GB/T3543.2确定，送验样品和净度分析按GB/T2930.1确定，每批种子最大重量不得超过10000kg，净度分析最小重量20g，送验样品最小重量200g，容许差距为5%；若超过规定重量时，须另行划批，并分别给以批号。若小于或等于规定重量的1%时，称作小批种子。分取试验样品采用“徒手减半法”：将种子均匀地铺在清洁的台纸上；使用平边刮板将样品先纵向混合，再横向混合，重复混合4～5次，充分混匀；把种子堆分成两半，每一半再对分一次，分离得到均匀的四部分，把其中的每一部分半分成八个部分，排成两行，每行四个部分。合并和保留交错部分，把留下各部分拿开，将上一步保留的部分，再重复步骤分样，直至分得所需样品重量的左右为止。2.3种子净度分析连翘种子净度分析中送检样品的最小重量为15g（至少含有2500粒种子）。送检样品的重量应超过净度分析量的10倍以上，至少150g。将每份试验样品按净种子、杂质分开，分别称重，以g表示，计算净种子的百分率。山西省不同地区的16份连翘种子，均存在其他植物种子，净度在74.20%-97.21%之间，各试样增失差距均没有偏离原始质量的5%，为有效数据。表2不同产地连翘种子净度测定序号产地样品称重/g花芽/g果梗/g其他种子/g净重/g净度/%1长治县5.00180.05640.04530.03794.862297.212壶关县5.00200.14370.08000.0644.714394.253屯留县5.00150.49260.29980.00344.205884.094长子县5.00190.21590.05360.06764.664893.265平顺东寺头乡5.00410.10330.07320.10924.718494.296平顺虹梯关乡5.00100.59970.25650.05004.157883.147沁源县5.01020.43250.28710.5733.717674.208黎城县5.00100.77240.21560.15023.862877.249左权县5.01630.76990.10220.11314.031180.3610陵川县5.00220.57820.04460.18723.782275.6111泽州县5.00350.20690.10350.00134.691893.7712沁水县5.00080.37100.10020.1244.517290.3313安泽县5.00210.52340.35260.31603.810176.1714古县5.00170.58690.42310.26743.724374.4615闻喜县5.00150.48310.29870.13354.086281.7016夏县5.00150.42150.11270.0744.399387.96使用此方法作净度分析，各试样增失差距均没有偏离原始质量的5%，所以此方法和程序切实可行。结果见表2。由表2可以看出，16个不同地区连翘种子的净度有明显差异。其中官儿村的连翘种子净度最高，其值为97.21%；沁源县的种子净度最低，其值为74.20%。2.4真实性鉴定采用种子外观形态法进行，从供试样品中随机数取100粒净种子，4次重复，在显微镜下逐粒观察种子的形态特征，并测定其长度、宽度。连翘种子小，一侧有翅，整体形状以半弯月、弯月和长卵形为主。通过对连翘种子长度和宽度的测量，表明连翘种子的长度在6.68-7.48mm之间，连翘种子的宽度在1.97-2.20mm之间。表面棕黄色或褐色，有光泽，含油分，胚细小，直生，子叶2枚。这些特征可以作为连翘种子与其他植物种子鉴别的主要形态特征。2.5重量测定随机选取三份净重，在百粒重，五百粒重，千粒重这三种方法中，结果：三份材料采用五百粒法的变异系数都小于4%；而采用千粒法，虽然公司材料的变异系数很小，但东寺头材料却接近4%。五百粒重差异最小，因此，选五百粒重作为连翘种子重量的检测标准，种子五百粒重多为1.7g左右，其中长治县种子大而饱满，五百粒重高达2.14g，沁水种子五百粒重最小为1.2304g，结果见表3。表3连翘种子重量分析预实验结果不同产地百粒法五百粒法千粒法百粒重/g标准差/g变异系数/%五百粒重/g标准差/g变异系数/%千粒重/g标准差/g变异系数/%长治县0.4280.01212.822.14110.02461.154.36750.10312.36壶关县0.33130.01093.28811.69430.00251.4883.31050.00581.757东寺头0.32890.01354.10341.64190.02031.23563.31810.11993.6132均值0.36270.01223.40381.82580.01581.29123.66540.0472.57672.6不同产地连翘种子的含水率经试验，采用高温整粒法测定含水率，连翘种子含水率多在6%左右，其中沁水种子含水率最高，为7.71%，而左权和壶关种子含水率最低，为6.01%。结果见表5。2.7种子吸水曲线图1连翘种子吸涨曲线图1为连翘种子吸涨曲线。种子浸种后吸涨后立即启动，种子重量急剧增加，浸种4-12小时是吸水最快期，而后缓慢吸水，至24小时后，吸水停止。在后期的种子活力检测中种子要预先浸泡24小时，使种子充分吸涨后再进行TTC染色。2.8不同产地种子活力检测采用TTC检测法，采用四因素四水平正交试验，浸种时间：20h，24h，28h，32h；染色温度：25℃，30℃，35℃，40℃；染色时间：12h，16h，20h，24h；TTC浓度：0.1%，0.2%，0.3%，0.5%。如表4。表4长治县连翘种子活力检测预实验结果序号浸种时间（h）染色温度（℃）染色时间（h）TTC浓度(%)实验结果(%)平均值（%）12312025120.186909490.00022030160.283857982.33332035200.375777475.33342040240.511131011.33352425160.372706970.33362430120.580858583.33372435240.193959393.66782440200.27766.66792825200.554525553.667102830240.380818080.333112835120.287848786.000122840160.178108.333133225240.256596058.333143230200.185838684.667153235160.556535554.667163240120.376737474.333如上表结果，用TTC法染色，浸种时间24h，TTC浓度为0.1%，染色时间为16h，染色温度35℃。不同产地连翘种子生活力在66%-96%，壶关种子活力较高，屯留种子活力较低。结果见表5。2.9不同产地种子发芽率检测不同产地连翘种子发芽率差异明显。其中发芽最快的是东寺头种子，发芽率最高的是陵川种子，为91%，图2为长治县连翘种子发芽情况，发芽率最差为闻喜种子，没有发芽，在发芽率相同时，发芽势高的种子，说明种子生命力强，在场地的播种发芽率较高，播种后幼苗出土正常。。结果见表5。图2连翘种子发芽情况（从左至右依次为发芽1d，3d，10d）表5不同产地连翘种子净度、千粒重、含水率序号产地种子净度/%五百粒重/g含水率/%发芽率/%发芽势/%种子活力/%1长治县97.212.14116.6488.3328.6790.002壶关县94.251.69436.0182.0025.6796.003屯留县84.091.34076.7585.3324.3366.004长子县93.261.86526.1562.6716.0088.005平顺东寺头乡94.291.64196.0619.671.6792.676平顺虹梯关乡83.141.55706.0769.0023.0093.337沁源县74.201.72486.5066.3311.0090.008黎城县77.241.39067.5512.670.3393.339左权县80.361.79186.0190.0032.3388.6710陵川县75.611.66566.0891.0020.6778.0011泽州县93.771.71587.5171.3328.0090.0812沁水县90.331.23047.7141.0012.6791.5713安泽县76.171.73186.5592.0021.0085.3314古县县74.461.62566.4170.66722.3394.6715闻喜县81.701.21557.200078.6716夏县87.961.63966.5351.6721.6769.332.10连翘种子系统聚类分析图3.山西省16个不同地区连翘种子系统聚类分析由图3可以得出16个不同地区的种子规律的分成了三个集群，其中样品5、8、15聚到一块，样品编号12、16聚到一块，剩余样品编号聚到一块。以发芽率指标为分级第一参考指标，综合考虑净度、千粒重、含水量等指标，将种子分为三级。2.11连翘种子质量分级标准的制定将山西省地区的连翘种子划分为3类，即3个等级（见表6）。以连翘种子净度、五百粒重、含水率、生活力、发芽率五项指标,去除发芽率低于50%的不合格的4份种子，SPSS软件做K聚类分析，最终类中心值见表6。表6K类中心聚类分析结果（n=12）类别净度/%五百粒重/g含水率/%活力/%发芽率/%197.212.146.4194.6788.33287.961.706.5390.0070.67374.461.626.6469.3351.67以连翘种子净度、五百粒重、含水率、生活力、发芽率五项指标，作为连翘种子分级标准的参考值，并在此基础上制定了连翘种子质量分级标准，见表7。除去发芽率低于50%的不合格种子，12份试样中Ⅰ级有3个，Ⅱ级有5个，Ⅲ级有4个。此标准可为连翘种子品质检验提供一定参考。表7连翘种子质量分级标准级别净度/%五百粒重/g含水率/%发芽率/%形态1≧98≧2.2≦6.5≧89均匀、有光泽、饱满、无杂质2≧88≧1.7≦6.5≧71较均匀、略有光泽、较饱满、有瘪粒和杂质3≧74≧1.6≦6.6≧51不均匀、无光泽、瘦瘪，杂质较多3讨论种子分级的5项指标中，发芽率和五百粒重2项指标作为主要分级依据。其中发芽率为重中之重，因为发芽率的高低决定了种子的实际利用价值，依据发芽率可以计算出田间实际种子播种量，参考价值很高。种子活力是种子发芽和出苗率、幼苗生长的潜势、植株抗逆能力和生产潜力的总和，是种子品质的重要指标。而种子重量可以反映种子的成熟度和饱满度。含水量、净度、种子活力3个指标作为次要分类依据，种子净度反映清洁度、纯度，含水率反映种子对储藏条件的要求，净度和含水率也可以通过再加工来提高质量。