【团体标准】 污水、污泥中总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定荧光光度法

9.1接种9.1.1污水接种：将100mL待测样品放入含有2g培养基（5.2.1或5.2.2）的检测瓶（6.4）中，混匀。9.1.2污泥接种：制备后的污泥样品用天平（6.5）称取10.0g放于灭菌三角瓶中，加100mL无菌水(5.7),充分摇匀，若污泥样品颗粒较大，可将三角瓶置于振荡器上振荡3min,制成均匀样液，作为原液。用10mL灭菌移液管吸取10mL原液加入装有90mL无菌稀释水(5.8)的三角瓶中，摇匀，制成1:10稀释度的均匀样液。按上述操作步骤，依次配制稀释10倍样液，如此每递增1次，即换用1支10mL灭菌移液管。根据污泥样品含菌量的估计，选择2个或3个适宜浓度的稀释样液100mL加入含有2g培养基（5.2.1或5.2.2）的检测瓶（6.4）中，混匀。9.2培养和检测打开仪器电源开关，将接种后的检测瓶放置于微生物快速检测仪中，按照仪器说明书进行操作，选择相应的测定参数，“总大肠菌群和大肠埃希氏菌”或“粪大肠菌群”，点击“检测”按钮，2h～18h，仪器自动培养得出结果。10对照试验10.1空白对照采用无菌水（5.7）作为待测水样按照9.1和9.2进行空白测定，测试结果不应检出，否则该次样品测定结果无效，应重新测定空白以及待测样品。10.2阴性和阳性对照总大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪大肠菌群的阴性、阳性菌株参考表3。表3阴性、阳性菌株参考表检测指标阳性菌种阴性菌种总大肠菌群大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)假单胞菌属(Pseudomonassp.)大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌假单胞菌属粪大肠菌群大肠埃希氏菌（耐热型）假单胞菌属将阳性菌株大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)标准菌株ATCC25922(CICC10305或其他等效标准菌株)和阴性菌株假单胞菌属(Pseudomonassp.)有证标准物质NCTC12951或其他等效标准菌株制成300个/mL～3000个/mL的菌悬液，将菌悬液按接种(9.1)和培养和检测(9.2)要求操作，阳性菌株应呈现阳性反应；阴性菌株呈现阴性反应，否则，该次样品测定结果无效，应重新测定。注：可先制备较高浓度菌悬液，采用血球计数器在显微镜下对其浓度进行初步测定，然后根据实际情况用无菌水(5.5)稀释至300个/mL～3000个/mL。