【团体标准】 高纯度苦瓜素类化合物的制备技术标准

利用柱过载临界点的多级液相色谱分离化合物，采用三级高效液相色谱分离，（一）新鲜苦瓜茎叶干燥，研磨成粉；（二）100%甲醇对苦瓜茎叶干粉进行浸提24h，甲醇与苦瓜茎叶干粉的用量比为1:5～10（g:mL）。浸提液过滤浓缩，得到粗提物；（三）对粗提物进行一级高效液相色谱分离，分别收集18～26min时间段和30～42min时间段的流出液，浓缩，即得一级分离物1和一级分离物2；（四）分别对一级分离物1和一级分离物2进行二级高效液相色谱分离，对于一级分离物1分别收18～22min时间段和24～26min时间段的流出液，干燥浓缩，得二级分离物1-1和二级分离物1-2，对于一级分离物2收集33～37min时间段的流出液，干燥浓缩，得二级分离物2-1；（五）分别对二级分离物1-1、二级分离物1-2、二级分离物2-1进行三级高效液相色谱分离，分别收集20～24min时间段、23～26min时间段以及34～37min时间段的流出液，干燥浓缩，分别得到苦瓜素Ⅱ、苦瓜素L和苦瓜素Ⅰ。（六）高效液相色谱分离的的参数为：流动相为80%甲醇、柱温度为28℃、流速为2.5mL/min、分离柱为AgilentXB-C18、检测波长为210nm。获得了纯度达99%以上的苦瓜素类化合物，产率比以前的提取方法提高了100%，时间缩短为50h，大大缩短高效液相色谱分离所需的总时间，提纯过程耗时短、效率高，能定向高效大量地提纯制备高纯度的苦瓜素类化合物。